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开始蛋白结晶前的4个质量评价参数

实现成功结晶的最重要因素之一是蛋白质的质量。优化蛋白质的纯度和均一性，同时保持其组成和结构，可增加成功结晶的机会。

在结晶之前，应评价以下质量参数：

纯度

  • 蛋白质纯度 是成功结晶的关键
  • 根据SDS-PAGE和考马斯蓝染色法. 评估，黄金城集团通常建议蛋白质纯度至少为95%。一般的金属离子纯化方法可使蛋白质纯度超过95%。
  • 整个样品的翻译后修饰应是均一的。

均一性

  • 整个样品中的蛋白质应具有相同的形态和大小。
  • 使用凝胶过滤法以确保纯化后的样品具有均一性。
  • 如有可能，使用动态光散射法评估样品，以确认蛋白质群体的均一性。

组成

  • 在整个纯化过程中蛋白质会发生降解。
  • 因此，建议在纯化后立即进行结晶。

结构

  • 最好在结晶前进行圆二色（CD）光谱分析，以确认蛋白质的二级结构。
  • 如有可能，通过适当的定量分析法检查蛋白质的生物活性。

蛋白质纯化树脂

蛋白质A、G和L树脂
磁珠
eStain 2.0蛋白质染色系统
ExpressPlus™ PAGE凝胶
蛋白质标准品

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