Ready-Edit LNP平台的核心优势

靶向递送

LNPs可以通过优化设计来提高CRISPR系统载荷的递送效率

降低脱靶效应

使用mRNA作为基因编辑工具的载体，其瞬时表达特性显著降低了脱靶效应，提高了基因编辑的精准度。

可扩展性与生产能力

基于体外转录（IVT）技术，mRNA可快速合成并支持大规模生产，满足从研发到临床前的多种应用需求。

安全性

mRNA不整合入宿主基因组，从根本上减少了插入性突变的风险，显著提高基因编辑系统的安全性。

ReadyEdit LNP解决方案服务内容

1. 项目启动

使用ReadyEdit LNP解决方案快速启动您的研究项目，支持以下系统和技术：

• Cas9系统
• Cas12系统
• 碱基编辑与先导编辑

2. 编辑系统构建

构建您的CRISPR编辑系统，包括以下核心要素的合成：

• mRNA
• sgRNA
• ssDNA
• 以及更多关键成分

3. LNP配方优化

针对特定CRISPR应用提供经过验证和优化的LNP配方：

• CRISPR 系统组分比例推荐
• 显著提升项目成功率

4. 数据验证

基于强大的筛选平台，验证基因编辑LNP，确保设计的有效性。

案例分享

• 基因敲除 - 使用Cas9 mRNA-LNP系统在人原代T细胞中实现TRAC基因编辑

  实验结果：在原代T细胞TRAC基因位点，SM102配方实现了超过70%的基因编辑效率，展现了卓越的递送能力和基因编辑效果。

  

  实验方法：将espCas9-mRNA和SafeEdit TRAC sgRNA按摩尔比1:10共同包裹于LNP中。每孔转染含2.4µg总RNA的LNP。72小时后收集细胞，提取基因组DNA（gDNA），通过Sanger测序检测 TRAC基因位点的插入/缺失突变比例，并使用ICE工具对基因编辑效率进行分析。

• 基因敲除-使用Cas9 mRNA-LNP系统在小鼠T细胞和Jurkat细胞中实现TRAC基因编辑

  实验结果：在小鼠T细胞系（3A9）中，使用不同的sgRNA靶点，基因编辑效率（Indel%）最高超过70%。在人源T细胞系（Jurkat）中，基因编辑效率达到80%，验证了SM102配方的卓越递送能力和高效基因编辑效果。

  

  

  实验方法：将espCas9-mRNA和SafeEdit TRAC sgRNA按摩尔比1:10共同包裹于LNP中，每孔转染含2.4µg总RNA的LNP，与目标细胞（3A9 和 Jurkat 细胞）共同孵育72小时。实验后收集细胞并提取基因组DNA（gDNA），通过Sanger测序分析TRAC基因位点的插入/缺失突变（Indel），并使用ICE工具分析基因编辑效率。此外，为验证sgRNA的靶向性能，设计了6种不同的sgRNA（sgRNA-1 至 sgRNA-6），分别靶向小鼠TRAC基因的不同间隔序列。

• 基因敲入-Cas9 mRNA-LNP系统

  实验结果：使用ALC0315 LNP三合一递送系统，实现了目标基因的敲入，敲入效率27%，验证了该递送系统在基因编辑中的有效性。

  
• 基因敲除-使用Cas12a mRNA-LNP系统在细胞中实现高效基因编辑

  实验结果： 在HEK293T细胞中，使用Cas12a系统的编辑效率可高达80%。

  

  实验方法： 将Cas12a mRNA和SafeEdit TRAC sgRNA按质量比5:1共同包裹于LNP（SM102-LNP和ALC0315-LNP配方）中，作为递送系统。将LNP包裹的RNA转染至HEK293T细胞，并检测两种细胞培养条件下（DMEM + 10% FBS和OptiMEM + 10% FBS）的基因编辑效率。转染72小时后裂解细胞，提取基因组DNA，并通过NGS分析编辑效率。

• Prime Editing—先导编辑验证

  实验结果: 通过优化的LNP配方递送Pemax先导编辑系统，在HEK293T细胞中实现了超过60%的基因编辑效率。同时ngRNA的加入可显著提高编辑效率。

  

  实验方法：将PEmax mRNA和HEK3 pegRNA（包含或不包含ngRNA）共同包裹于SM102 Mod-LNP中。将2µg RNA-LNP转染至2×10^5个 HEK293T细胞中。转染后48小时收集细胞，提取基因组DNA，通过NGS验证基因编辑效率。

• 有效验证的ReadyEdit CRISPR LNP方案

  编号	LNP配方	mRNA	sgRNA	测试细胞系及编辑效率
  1	SM102-LNP	espCas9	TRAC	HEK293T 97%, Jurkat 82%, T cells72% , HepG2 86%
  2	ALC0315-LNP	espCas9	TRAC	HEK293T 87%, Jurkat 80%, T cells 61%
  3	LP01-LNP	espCas9	TRAC	HEK293T 63%, Jurkat 75%
  4	20DODAP-LNP	espCas9	PCSK9	HepG2 87%
  5	SM102-SOPC LNP	espCas9	PCSK9	HepG2 90%
  6	SM102-LNP	HifiCas9	TRAC	HEK293T 97%, T cells 61% , HepG2 88%
  7	SM102-SOPC LNP	espCas9	TRAC	HepG2 90%
  8	SM102 LNP	Cas12a Ultra	TRAC	HEK293T 63%
  9	SM102-Mod LNP	PEmax	HEK3 pegRNA Nicking guide RNA	HEK293T 62%
  10	CXM2-LNP	CBE	TRAC	HEK293T 34%
  11	SM102-Mod LNP	CBE	TRAC	HEK293T 42%