选择合适的抗原是您开始定制抗体项目时重要的决定之一。如果您不确定如何开始,首先要考虑目标蛋白的性质以及您期望的应用。这些因素应作为指导抗原选择策略的必要指南。 对于大多数项目,可以选择两种方法之一来实现定制化抗体生产。第一种也是较受欢迎的是使用蛋白作为免疫原。第二种运用抗原设计软件,基于靶蛋白的天然序列预测出的短肽序列作为免疫原。下面提供了一个信息指南指导您选择哪一种策略。
适用于以下应用:
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多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心选择的短氨基酸序列。当目标蛋白的获取受限时,多肽是一种合适的解决方案。它们也是检测靶蛋白翻译后修饰(PTM)位点的理想抗原,因为它们限制了潜在表位的数量。虽然潜在表位少对于大多数抗体项目和应用来说是缺点,但是当产生PTM抗体时,有限数量的表位使得发现仅针对PTM位点的反应性抗体更易。
多肽抗原由于其价格低和周期短而具有吸引力,但更重要的是要考虑它的局限性。蛋白质抗原能够诱导针对构象表位的抗体,而针对肽抗原的抗体只能识别线性表位。尽管多肽产生的抗体可以在其他应用中起作用。但多肽抗原的价值主要体现在翻译后修饰检测抗体的制备。例如,抗多肽抗体可以应用于Western blots和ELISA。然而,线性化蛋白必须包括用于免疫的固有线性多肽抗原的表位,以确保阳性结果。
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