免疫球蛋白是免疫系统中的重要检测分子。在五大类免疫球蛋白当中,以µ重链为特征的免疫球蛋白M(IgM)抗体是最大的一类。该蛋白以B细胞膜结合单体与分泌五聚物的形式生成。IgM是人类胎儿发育到20周时产生的第一种免疫球蛋白。不同于为胎儿提供被动免疫的IgG抗体,IgM抗体分子较大,无法通过胎盘。该抗体同时也是感染期间最先做出响应的抗体。因其能与特异性抗原结合,而无需事先进行免疫,IgM抗体被称为"天然抗体"。尽管只是一种单纯的免疫状态,但这种反应能力极有可能源于其亲和力和多反应性。另外,IgM抗体也会在对抗感染时产生,称为“免疫IgM抗体”。这些抗体在一周左右产生,并在血清中持续存在5-8天。虽然IgG抗体一直是科研和治疗应用领域内占据主导地位的抗体类型,但人们的注意力正转向其他抗体类别,如IgM抗体,有其独特的特性和相应的优势。参见以下对比表。
图1:IgM五聚物和IgG单体的结构如上图所示。
特性 | IgM抗体 | IgG抗体 |
---|---|---|
大小 | 970 kDa | 150 kDa |
免疫球蛋白结构 | 五聚物(B细胞受体单体) | 单体 |
存在位置 | 淋巴和血液 | 血液、淋巴,可通过胎盘 |
结合位点 | 10 | 2 |
免疫功能 |
|
|
在感染期间,由(B1a) B细胞所生成的多反应性IgM抗体来提供先天性免疫或“自然免疫”。 IgM抗体可直接中和病原体或清除新的抗原,从而快速识别并启动免疫反应。IgM抗体介导的免疫应答有三个组成部分,分别是补体(C1qR和Fcα/µR)激活、吞噬细胞募集和调理作用。目前的研究表明,生成IgM抗体的B1b B细胞会记忆某些特定的病原体,并支持独立于T细胞的免疫反应。IgM抗体还能够发挥对免疫系统的教育作用,将抗原转运到淋巴组织内并诱导淋巴组织生成记忆。
IgM类抗体能够识别多种致病性抗原,由于其对补体系统的超强激活作用,因此在细胞毒性和细胞溶解反应中具有高度活性。IgM抗体可用于抗体药物发现。IgM抗体可成为一种有吸引力的疗法,原因如下。
近年来科技的进步已使IgM抗体变得易于控制,进一步调整其效应功能,以满足上述治疗需求。将IgM抗体视为潜在的标准平台还需要满足若干要求,包括体外优化、重组生产和纯化。已利用噬菌体展示技术对IgM抗体可变链进行了体外操作,以优化IgM治疗性抗体候选物。抗体候选物在细胞培养中的重组产量已经得到提升,纯化方法也得到了优化。基于这些技术进步,黄金城集团可以打造出IgM治疗平台。
与所有其他形式的免疫球蛋白相反,IgM抗体不能很好地与蛋白质A或蛋白质G结合进行纯化。传统洗脱技术也会对该抗体造成不利影响。直到最近,IgM抗体的稳定性和狭窄的溶解范围一直是纯化技术的难题。IgM抗体的尺寸大小非常适合于尺寸排阻纯化,但抗体体积较大时会限制速度。IgM单克隆抗体纯化技术的进步依赖于它们通常带有高电荷,从而可以通过离子交换进行纯化。羟基磷灰石是一种天然形成的矿物质,可在生理pH条件下与IgM抗体结合,提供了另一种分离方法。
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