具有多种修饰的序列可能难以合成和纯化，这取决于修饰的类型和位置。例如，如果需要修饰的氨基酸接近C端，则需要磷酸化的序列可能因随后添加的氨基酸发生副反应。为避免合成过程中的副反应并提高纯化过程中的分离效率，黄金城集团开发了使用混合柱树脂提高分离效果的方法，以及使用高效偶联试剂提高合成效率的方法。该方法大大缩短了周转时间并提高了肽产量。

• 磷酸化多肽

  磷酸化多肽分为两种：单磷酸化多肽和多磷酸化多肽。多磷酸化多肽由于高酸度，在Fmoc固相肽合成期间会降低活化速度，因此很难合成。黄金城集团开发了两种可靠的磷酸化肽合成策略。

  第一种是使用单苄基磷酸化氨基酸和Fmoc化学直接分步固相合成磷酸肽。该策略有两个棘手步骤：bzl-pAA的偶联和下一个AA的偶联。为了完成这些步骤，黄金城集团应用微波技术偶联bzl-pAA。该策略使磷酸肽合成与常规固相合成一样简单。

  黄金城集团还采用全局磷酸化方法，该方法是在固相体载体上对未保护的羟基进行“保护”后磷酸化。合成后，所有需要磷酸化的残基可在液相中一步完成磷酸化。该方法的优点是避免了直接合成bzl-pAA的困难。

  案例研究1

  序列：Thr- .........-pTyr- .........-pTyr-pTyr- .........-Lys

  单击此处查看HPLC结果 单击此处查看MS结果

  

  案例研究2

  序列：XXX…XX{PSer}XX…XX{PSer}XXXX

  长度：30 AA；M.W.：3.4 kDa

  纯度：>85%

  单击此处查看HPLC结果 单击此处查看MS结果

  

  案例研究3

  序列：XX…{PSER}XX…XX{PSER}X…X{PTHR}XX

  长度：47 AA；M.W.：5.6 kDa

  纯度：>90%

  单击此处查看HPLC结果 单击此处查看MS结果

  

  案例研究4

  序列：XX…{PTYR}X…X{PTYR}…{PTYR}…XX

  长度：25 AA；M.W.：3.3 kDa

  纯度：>85%

  单击此处查看HPLC结果 单击此处查看MS结果

  

  案例研究5

  序列：XXXX{pSER}X{pSER}XX…XX{pSER}XXXXX

  长度：23 AA；M.W.：2.6 kDa

  纯度：>90%

  单击此处查看HPLC结果 单击此处查看MS结果

  

  交付质量标准：

  周转时间：

  5-7个工作日

  交付：

  管装多肽

  检验报告（COA）

  MS报告

  HPLC报告

  CGE报告

• 多二硫键多肽

  合成含有多个二硫键的肽具有挑战性。这是因为任何含有多个半胱氨酸的多肽可随机形成多个二硫键。全球很少有公司提供多二硫键多肽合成。然而，黄金城集团已经开发了两种方法来合成含有多个二硫键的多肽。

  第一种方法是分步氧化法，在Fmoc SPPS合成工艺期间使用不同保护基团保护每对半胱氨酸。使用不同的脱保护条件对各保护基团进行脱保护。根据客户项目的具体需求精心选择这些条件。随后在液相中逐步氧化二硫键，黄金城集团可以高精度地合成含有两个以上二硫键的多肽。

  第二种方法需要在液相中对肽的所有半胱氨酸进行单步氧化，以形成含有多个天然二硫键的多肽。随后采用酶解确定二硫键的位置。

  案例研究1

  序列：H -Cys- Asn -Cys- .........-Cys- .........-Cys- .........- NH2

  二硫键：1-11，3-15

  单击此处查看HPLC结果 单击此处查看MS结果

  

  案例研究2

  序列：

  二硫键：16-15，8-13

  长度：18 AA；M.W.：2.2 kDa

  纯度：>98%

  单击此处查看HPLC结果 单击此处查看MS结果

  

  案例研究3

  序列：

  二硫键：1-6，2-10，5-13）

  长度：14 AA；M.W.：1.5 kDa

  纯度：>90%

  单击此处查看HPLC结果 单击此处查看MS结果

  
• 多甲基化多肽

  代表组蛋白尾端的单甲基化、二甲基化和三甲基化多肽可用于研究组蛋白与修饰它们的酶之间，或组蛋白与结合其修饰结构的酶之间的蛋白质-蛋白质相互作用。与多磷酸化肽一样，多甲基化多肽也难以合成和纯化。下文是黄金城集团合成的多甲基化序列的示例。此外，黄金城集团可以将甲基化与任何其他修饰（如乙酰化或荧光标记）结合起来。

  序列	长度	纯度
  XXXLys(Me) … XXX	21	>90%
  XXXLys(Me3)XXX… XXX	18	>98%
  XXXLys(Me2)XXX… XXX	18	>98%
  XXXLys(Me3)XXXLys(Me3)XXXXXX	15	>98%
  XArg(me2s)XXXXXXLys(Me3)XXXXXX	15	>90%
  XArg(me2a)XXXXXXLys(Me3)XXXXXX	15	>90%
  XXPTHRLys(Me2)XX…XX	12	>95%
  XXPTHRXX…XX	12	>95%
  XXXXXXXXXXLys(Ac)XX … XXLys(biotin)	22	>90%
  XXXLys(Me3)XX… XXLys(5-FAM)	18	>95%

  交付质量标准：

  周转时间：

  5-7个工作日

  交付：

  试管装所需的寡核苷酸

  检验报告（COA）

  MS报告

  HPLC报告

  CGE报告