黄金城集团

具有多种修饰的序列可能难以合成和纯化,这取决于修饰的类型和位置。例如,如果需要修饰的氨基酸接近C端,则需要磷酸化的序列可能因随后添加的氨基酸发生副反应。为避免合成过程中的副反应并提高纯化过程中的分离效率,黄金城集团开发了使用混合柱树脂提高分离效果的方法,以及使用高效偶联试剂提高合成效率的方法。该方法大大缩短了周转时间并提高了肽产量。

  • 磷酸化多肽

    磷酸化多肽分为两种:单磷酸化多肽和多磷酸化多肽。多磷酸化多肽由于高酸度,在Fmoc固相肽合成期间会降低活化速度,因此很难合成。黄金城集团开发了两种可靠的磷酸化肽合成策略。

    第一种是使用单苄基磷酸化氨基酸和Fmoc化学直接分步固相合成磷酸肽。该策略有两个棘手步骤:bzl-pAA的偶联和下一个AA的偶联。为了完成这些步骤,黄金城集团应用微波技术偶联bzl-pAA。该策略使磷酸肽合成与常规固相合成一样简单。

    黄金城集团还采用全局磷酸化方法,该方法是在固相体载体上对未保护的羟基进行“保护”后磷酸化。合成后,所有需要磷酸化的残基可在液相中一步完成磷酸化。该方法的优点是避免了直接合成bzl-pAA的困难。

    案例研究1

    序列:Thr- .........-pTyr- .........-pTyr-pTyr- .........-Lys

    Multi-phosphorylated peptides Case study 1 HPLC results Case study 1 MS results

    案例研究2

    序列:XXX…XX{PSer}XX…XX{PSer}XXXX

    长度:30 AA;M.W.:3.4 kDa

    纯度:>85%

    案例研究3

    序列:XX…{PSER}XX…XX{PSER}X…X{PTHR}XX

    长度:47 AA;M.W.:5.6 kDa

    纯度:>90%

    案例研究4

    序列:XX…{PTYR}X…X{PTYR}{PTYR}…XX

    长度:25 AA;M.W.:3.3 kDa

    纯度:>85%

    案例研究5

    序列:XXXX{pSER}X{pSER}XX…XX{pSER}XXXXX

    长度:23 AA;M.W.:2.6 kDa

    纯度:>90%

    交付质量标准:

    周转时间:

    5-7个工作日

    交付:

    管装多肽

    检验报告(COA)

    MS报告

    HPLC报告

    CGE报告

  • 多二硫键多肽

    合成含有多个二硫键的肽具有挑战性。这是因为任何含有多个半胱氨酸的多肽可随机形成多个二硫键。全球很少有公司提供多二硫键多肽合成。然而,黄金城集团已经开发了两种方法来合成含有多个二硫键的多肽。

    第一种方法是分步氧化法,在Fmoc SPPS合成工艺期间使用不同保护基团保护每对半胱氨酸。使用不同的脱保护条件对各保护基团进行脱保护。根据客户项目的具体需求精心选择这些条件。随后在液相中逐步氧化二硫键,黄金城集团可以高精度地合成含有两个以上二硫键的多肽。

    第二种方法需要在液相中对肽的所有半胱氨酸进行单步氧化,以形成含有多个天然二硫键的多肽。随后采用酶解确定二硫键的位置。

    案例研究1

    序列:H -Cys- Asn -Cys- .........-Cys- .........-Cys- .........- NH2

    二硫键:1-11,3-15

    案例研究2

    序列:

    二硫键:16-15,8-13

    长度:18 AA;M.W.:2.2 kDa

    纯度:>98%

    案例研究3

    序列:

    二硫键:1-6,2-10,5-13)

    长度:14 AA;M.W.:1.5 kDa

    纯度:>90%

  • 多甲基化多肽

    代表组蛋白尾端的单甲基化、二甲基化和三甲基化多肽可用于研究组蛋白与修饰它们的酶之间,或组蛋白与结合其修饰结构的酶之间的蛋白质-蛋白质相互作用。与多磷酸化肽一样,多甲基化多肽也难以合成和纯化。下文是黄金城集团合成的多甲基化序列的示例。此外,黄金城集团可以将甲基化与任何其他修饰(如乙酰化或荧光标记)结合起来。

    序列 长度 纯度
    XXXLys(Me) … XXX 21 >90%
    XXXLys(Me3)XXX… XXX 18 >98%
    XXXLys(Me2)XXX… XXX 18 >98%
    XXXLys(Me3)XXXLys(Me3)XXXXXX 15 >98%
    XArg(me2s)XXXXXXLys(Me3)XXXXXX 15 >90%
    XArg(me2a)XXXXXXLys(Me3)XXXXXX 15 >90%
    XXPTHRLys(Me2)XX…XX 12 >95%
    XXPTHRXX…XX 12 >95%
    XXXXXXXXXXLys(Ac)XX … XXLys(biotin) 22 >90%
    XXXLys(Me3)XX… XXLys(5-FAM) 18 >95%

    交付质量标准:

    周转时间:

    5-7个工作日

    交付:

    试管装所需的寡核苷酸

    检验报告(COA)

    MS报告

    HPLC报告

    CGE报告

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